La lyophilisation, également connue sous le nom de lyophilisation, est un procédé utilisé pour conserver le matériel biologique en l'eau de l'échantillon, ce qui implique d'abord de congeler l'échantillon puis de le sécher, sous vide, à très basse température les températures. Les échantillons lyophilisés peuvent être stockés beaucoup plus longtemps que les échantillons non traités.
Pourquoi la lyophilisation est-elle utilisée?
Lyophilisation, ou lyophilisation des cultures bactériennes, stabilise les cultures pour un stockage à long terme tout en minimisant les dommages qui peuvent être causés par un séchage strict de l'échantillon. De nombreux micro-organismes survivent bien lorsqu'ils sont lyophilisés et peuvent être facilement réhydratés et cultivés dans des milieux de culture, après de longues périodes de stockage.
La lyophilisation est également utilisée dans biotechnologie et les industries biomédicales pour conserver les vaccins, les échantillons de sang, protéines purifiéeset autre matériel biologique.
Cette courte procédure de laboratoire peut être utilisée avec n'importe quel lyophilisateur disponible dans le commerce pour préserver votre collection de cultures.
Le processus
Le processus de lyophilisation est en fait une application d'un phénomène physique appelé sublimation: la transition d'une substance d'un état solide à un état gazeux, sans d'abord traverser le liquide phase. Pendant la lyophilisation, l'eau de l'échantillon congelé est éliminée sous forme de vapeur d'eau, sans décongeler d'abord l'échantillon.
Erreurs fréquentes
L'une des erreurs les plus courantes en matière de lyophilisation est de ne pas connaître le point de fusion de votre échantillon, ce qui rend difficile le choix du bon lyophilisateur. Vos échantillons peuvent fondre au cours du processus. Une autre erreur courante est de penser que plus froid est meilleur lors de la lyophilisation sur un lyophilisateur de type étagère. Pendant le séchage primaire, vous devez régler la température de conservation juste en dessous de la température eutectique de l'échantillon. Il devrait y avoir juste assez de chaleur pour encourager les molécules de l'échantillon à bouger - mais empêcher la fusion.
Une troisième erreur consiste à utiliser le mauvais équipement pour vos échantillons. Les lyophilisateurs étant utilisés en groupe, vous devez connaître les éléments suivants avant d'en acheter un:
- Quelle quantité d'humidité sera lyophilisée
- Qu'est-ce que l'échantillon (et la température eutectique)
- Comment utiliser correctement le lyophilisateur
Si l'appareil n'est pas utilisé correctement, il pourrait ruiner tous les échantillons. Ce qui nous amène à une autre erreur courante: ne pas entretenir la pompe à vide. La pompe doit être en excellent état de fonctionnement pour que la lyophilisation fonctionne. Faire fonctionner la pompe avec le ballast à gaz ouvert 30 minutes avant et après le processus de lyophilisation augmentera la durée de vie de la pompe. L'ouverture du ballast à gaz purge les contaminants de la pompe pour éviter d'endommager les composants internes. Vous devriez vérifier l'huile de la pompe souvent pour décoloration et particules, et changer l'huile au besoin. Des vidanges d'huile régulières maintiennent la pompe tirant à un vide optimal pendant le processus de lyophilisation.
Enfin, avoir les mauvais accessoires de lyophilisation pour votre processus de lyophilisation peut également être une grosse erreur. Avez-vous besoin d'un échantillon de bouchon sous votre vide? Ensuite, une chambre d'arrêt est nécessaire. Êtes-vous lyophilisé dans des flacons? Assurez-vous alors d'avoir une chambre de séchage avec des ports.
En évitant les erreurs ci-dessus, vous pouvez mieux entretenir votre lyophilisateur et votre pompe, et obtenir de meilleurs échantillons lorsque votre lyophilisation est terminée.
Références
Labconco News. "Top 5 des erreurs commises dans le processus de lyophilisation."