Le tampon citrate de sodium est fréquemment utilisé pour l'isolement de l'ARN, car il minimise l'hydrolyse de base des brins d'ARN, ce qui le rend inestimable pour la purification de l'ARNm pendant génomique la recherche et pour étudier la transcription. Les tampons à base de citrate facilitent également la détection des antigènes dans les préparations de tissus fixes, car ils rompent les réticulations formées entre les antigènes et le milieu de fixation.
Avec les étapes faciles suivantes, on peut créer un tampon de citrate de sodium avec un pH de 6 (acide) en moins de 10 minutes.
Matériaux pour le tampon citrate de sodium
Peu de matériaux sont nécessaires pour fabriquer le tampon citrate de sodium. Avec l'acide citrique, il suffit de 1 M d'hydroxyde de sodium, d'eau distillée et d'une sonde de pH calibrée. Le citrate de sodium est facultatif.
La fabrication du tampon nécessite également un cylindre gradué de 1 litre, une fiole jaugée de 1 litre et trois bouteilles de 1 litre. Enfin, vous aurez besoin d'une barre d'agitation magnétique et d'un agitateur magnétique. Tous ces documents peuvent être trouvés à l'école,
laboratoires de chantier ou être acheté en ligne ou dans des magasins de produits spécialisés.Deux options pour créer le tampon
Il existe deux méthodes de fabrication de tampons de citrate de sodium, selon les matériaux qui vous sont accessibles.
- Si vous avez à la fois de l'acide citrique et la base conjuguée, créez une solution mère de chacun en mélangeant 21 grammes d'acide citrique dans 1 litre d'eau distillée, et 29,4 grammes de citrate de sodium dans 1 litre d'eau distillée l'eau.
- Si vous ne disposez que d'acide citrique, mélangez 2,1 grammes dans un peu moins d'un litre d'eau distillée.
Mélange de solutions d'acide citrique et de citrate de sodium
Mélanger 82 millilitres de la solution d'acide citrique avec 18 millilitres de la solution de citrate de sodium. Pour cela, ajoutez suffisamment d'eau distillée pour porter le volume du mélange à un peu moins de 1 litre.
Réglage du pH
Tout en agitant doucement la solution avec un agitateur magnétique, utilisez de l'hydroxyde de sodium 1 M pour ajuster le pH du mélange à 6,0. Ensuite, avec une fiole jaugée, ajoutez plus d'eau distillée pour porter le volume total final de la solution à exactement 1 litre.